2014年12月，國際知名雜志Journal of translational medicine（5-Year IF=4.1）連續(xù)在線發(fā)表了兩項生命科學(xué)研究院“發(fā)育與疾病相關(guān)基因”教育部重點實驗室萬亞坤老師課題組題為《Construction of a synthetic phage-displayed Nanobody library with CDR3 regions randomized by trinucleotide cassettes for diagnostic applications》和《Streptavidin-biotin-based directional double Nanobody sandwich ELISA for clinical rapid and sensitive detection of influenza H5N1》的研究工作。 (http://www.translational-medicine.com/content/12/1/343) (http://www.translational-medicine.com/content/12/1/352)。

在《Construction of a synthetic phage-displayed Nanobody library with CDR3 regions randomized by trinucleotide cassettes for diagnostic applications》這項研究中，研究人員以納米抗體保守框架cAbBCII10為VHH骨架結(jié)構(gòu)，通過搭橋PCR組裝，合成了一種CDR3區(qū)氨基酸序列隨機排布同時不含半胱氨酸及終止密碼子的VHH基因的噬菌體展示文庫。利用人前白蛋白PA和中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白NGAL為靶標(biāo)蛋白，成功篩選得到相應(yīng)的納米抗體?？贵w親和力較高，特異性強，耐熱性能良好?；讷@得的納米抗體，研究人員還構(gòu)建了一套有效的PA檢測方法。該文庫能夠解決某些抗原毒性大，致病性強，無免疫性或可溶性差等原因造成無法免疫駱駝從而不能構(gòu)建文庫以篩選相應(yīng)納米抗體的問題，可以作為免疫文庫的強有力支持。萬亞坤教授為通訊作者，碩士研究生嚴(yán)俊榮為第一作者。

在《Streptavidin-biotin-based directional double Nanobody sandwich ELISA for clinical rapid and sensitive detection of influenza H5N1》研究中，研究者首次構(gòu)建了針對高致病性甲型H5N1禽流感病毒的納米抗體文庫，從中篩選獲得了兩株特異、穩(wěn)定的納米抗體，并建立納米抗體生物素化系統(tǒng)，分析了基于鏈霉親和素定向捕獲生物素化的納米抗體的檢測系統(tǒng)。與常規(guī)雙抗夾心法相比，他們建立的這種新的定向捕獲法具有更加高的檢測靈敏度和更加寬的檢測范圍。與現(xiàn)有市場化的檢測產(chǎn)品和方法比較，該檢測系統(tǒng)能夠更加高效快速的檢測出禽流感H5N1病毒。為研發(fā)新型禽流感病毒相關(guān)檢測試劑盒奠定了堅實的基礎(chǔ)。萬亞坤教授為通訊作者，碩士研究生朱敏為第一作者。